נוהל עיקור תחמוצת אתילן

(1) על פי דרישות הבדיקה, הכינו את מתלי הנבגים ואת פרוסות החיידקים של Bacillus subtilis var. subtilis var. ניז'ר. פרוסות החיידק אטומות בשקיות ניילון פוליאתילן שכבה כפולה, 2 פרוסות לשקית . 20 שקיות משמשות לכל בדיקה.
(2) קבע נקודה אחת בשכבות הפנימיות, האמצעיות והחיצוניות של העוקר, בסך הכל 9 נקודות. הניחו תיק אחד באמצע כל נקודה, בסך הכל 18 שקיות של פרוסות חיידקים מבחן. הניחו תיק נוסף (2 פרוסות) של פרוסות חיידקים בטמפרטורת החדר כבקרה חיובית.
(3) בצע עיקור תחמוצת אתילן בתנאי עומס מלא על פי ריכוז תחמוצת האתילן, זמן הפעולה, הטמפרטורה והלחות היחסית בממשלה המפורטת במדריך ההוראות. העומס המלא תלוי במטרת המעיקר. לאחר הטיפול, הוצא את פרוסות החיידק, העביר אותן למדיום תרבות מרק תזונה של 5 מ"ל ותרבות אותם בחממה של 37 מעלות. שימו לב לתוצאות הסופיות לאחר 7 ימים (מבחן תרבות איכותי).
עבור צינורות מרק תזונתיים עם תוצאות שופט קשות לשופט, קח 0.2 מ"ל מהמתלה וחינה את צלחת האגר התזונה. השתמש במקל L סטרילי כדי להתפשט באופן שווה ולהניח בחממה של 37 מעלות לתרבות. לאחר 48 שעות, הכתמו את המריחה וצפו במורפולוגיה של המושבה תחת מיקרוסקופ, או בצעו בדיקות אחרות כדי לקבוע אם יש צמיחה או שמא הצמיחה היא חיידקי הבדיקה. אם זה לא חיידקי הבדיקה, יש לחזור על הבדיקה.
(4) במהלך הבדיקה יש להגדיר בו זמנית קבוצות ביקורת חיוביות איכותיות וכמותיות וקבוצות ביקורת שליליות.
(5) עבור קבוצת הביקורת החיובית הכמותית, הניחו את אותה אצווה של פרוסות חיידקים מבחן בטמפרטורת החדר. לאחר שהחיטוי או קבוצת בדיקות העיקור מגיעה לזמן הפעולה שצוין, הניחו מייד שני חתיכות של פרוסות החיידק בצינורות הבדיקה המכילים 5.0 מ"ל PBS ומנערים כל אחד 80 פעמים. קח את תמיסת השטיפה וספר את תרבות החיידקים החיים לפי השיטה המוצגת ב- 2.1.1.3.
(6) עבור קבוצת הביקורת החיובית האיכותית, הניחו את פרוסות החיידקים לבדיקה מאותה אצווה בטמפרטורת החדר. לאחר שקבוצת בדיקות העיקור מגיעה לזמן הפעולה שצוין, חיסו מייד 2 של פרוסות החיידק ל -5.0 מ"ל של מדיום מרק תזונה, הציבו אותם בחממה לתרבות איכותית, וצפו אם יש צמיחה של חיידקים.
(7) עבור קבוצת הביקורת השלילית, חיסול 2 פרוסות מדגם לא מזוהמות מאותה אצווה למדיום מרק מרק מזין, והניח את מדיום מרק התזונה הבלתי מחוסל בחממה לתרבות איכותית כדי לראות אם יש צמיחה חיידקית.
(8) המבחן חוזר על עצמו 5 פעמים.
(9) בכל אחת מ -5 הבדיקות, ספירת החיידקים שהתאוששה של פרוסות החיידקים החיוביות שליטה צריכה להיות בין 5 × 10 CFU/פרוסה לבין 5 × 10 CFU/פרוסה; לקבוצת הביקורת החיובית האיכותית צריכה להיות צמיחה טובה של חיידקים; והבקרה השלילית לא צריכה להיות בעלי צמיחה של חיידקים. אם תוצאות הבקרה החיוביות או השליליות אינן עומדות בדרישות לעיל, הבדיקה תהיה לא תקפה וחוזרת על עצמה.
תקנות הערכה
בחמש בדיקות העיקור, קבוצת הביקורת החיובית הכמותית בכל בדיקה הייתה ספירת חיידקים שזוהו ומחלימה של 5 × 10 CFU/חתיכה עד 5 × 10 CFU/חתיכה; לקבוצת הביקורת החיובית האיכותית הייתה צמיחת חיידקים טובה. לבקרה השלילית לא צריכה להיות צמיחת חיידקים. כאשר לכל חתיכות החיידקים הבדיקה אין צמיחה של חיידקים, העיקור נחשב כשיר.
אמצעי זהירות
(1) לטמפרטורה ולחות יחסית יש השפעה רבה על השפעת העיקור של גז תחמוצת אתילן, ולכן יש לשלוט בתנאים הרלוונטיים בבדיקה.
(2) נוזל תחמוצת אתילן יכול להמיס פוליאתילן, פוליוויניל כלוריד וכו ', ואין לטפטף את הנוזל שלו על פריטים כאלה. תחמוצת אתילן, בין אם נוזלים או גז, עלולים לפגוע במוצרי תאית, ולכן יש לנקוט בזהירות במהלך הבדיקה.
(3) תחמוצת אתילן דליקה ונפיץ. יש לנקוט באמצעי מניעת אש ופיצוץ באתר הפעולה, ואין לאפשר להבות פתוחות וניצוצות חשמליים.
(4) שאיפה של גז תחמוצת אתילן מוגזם עלולה לגרום לתסמיני הרעלה כמו כאב ראש והקאות, ובמקרים חמורים זה יכול לגרום לבצקת ריאתי. על סביבת העבודה להיות אוורור טוב. במהלך יום העבודה של 8 שעות, ריכוז תחמוצת האתילן לא אמור לעלות על 1.82 מ"ג/מ"ק (1 עמודים לדקה), וריכוז החשיפה במהלך העבודה של 15 דקות לא יעלה על 9.1 מ"ג/מ"ג (5.0 עמודים לדקה). אם מתרחשים תסמיני הרעלה, עזבו את הסצינה מייד. במקרים קלים, נשמו אוויר צח עד שהסימפטומים נעלמים; במקרים חמורים, שלח לבית חולים לטיפול בזמן.